HUSLAB - tutkimusohjekirja

Tutkimuksen B -MELAS-D (4664) tiedot vanhassa tutkimusohjekirjassa

HUOM! NÄMÄ TIEDOT EIVÄT OLE ENÄÄ AJAN TASALLA.

Tiedustelut

Genetiikan laboratorio, puh. 09 471 74339 toimisto tai 09 471 75905 lääkäri tai Genetiikanlaboratorio(at)hus.fi

Lähete

Geneettiset tutkimukset

Indikaatiot

MELAS-taudin diagnostiikka ja erotusdiagnostiikka.

Näyteastia

EDTA-putki 5/3 ml

Näyte

Näyte lähetetään huoneenlämpöisenä eikä se saa jäätyä. Tarvittaessa näytteen voi säilyttää jääkaapissa 1-3 vrk.

Meilahden alueella otettu näyte lähetetään välittömästi Genetiikan laboratorioon (putkipostiasema HUSLAB-talon moniajoasema 6300). Meilahden ulkopuolelta tuleva näyte toimitetaan osoitteella HUSLAB-talo, Näytteiden vastaanotto, Topeliuksenkatu 32, Tunnus 5000493, Info MNVO, 00006 VASTAUSLÄHETYS. Kiireelliset näytteet pyydetään merkitsemään paketin ulko- ja sisäpuolelle merkinnällä "Kiireellinen".

Mikäli potilaasta halutaan tutkia muitakin mitokondriaalisia pistemutaatioita, riittää yksi yhteinen näyte. Mikäli potilaan kudosnäytteestä pyydetään Ts-Mitok-D -tutkimus, pistemutaatiot voidaan tutkia samasta näytteestä eikä erillistä verinäytettä tarvita.

Menetelmä

NGS (next generation sequencing, massiivinen rinnakkaissekvensointi).

Tulokset valmiina

8 viikon kuluessa näytteen saapumisesta.

Yleistä

Mitokondriossa on oma 16,6 kb:n kokoinen DNA, joka koodittaa 13 valkuaista ja niiden synteesiin tarvittavat ribosomi- ja siirtäjä-RNAt. Nämä valkuaiset ovat hengitysketjuentsyymien alayksiköitä komplekseissa I, III, IV ja V. Mitokondrioiden DNA periytyy äidin munasoluissa kaikille lapsille.

MELAS-oireyhtymässä (mitokondriaalinen enkefalopatia, laktaattiasidoosi, kohtausmaiset "stroke-like" episodit) on 80 %:ssa tapauksia kuvattu mitokondrio-DNAn leusiini-tRNAn pistemutaatio A>G nukleotidissä 3243 (m.3243A>G). MELAS-oireyhtymän lisäksi m.3243A>G-mutaatio voi liittyä mm. etenevään silmälihasheikkouteen ja yleistyneeseen lihasheikkouteen, mitokondriaaliseen diabetes-kuurous oireyhtymään (MIDD, mitochondrial diabetes and deafness), sekä aikuis- tai juveniilialkuiseen hypertrofiseen kardiomyopatiaan. Taudin alkuikä vaihtelee varhaislapsuudesta varttuneeseen aikuisuuteen. Yleensä veren laktaatti on koholla, ja lihasbiopsian histologisessa tutkimuksessa nähdään sytokromi-c-oksidaasi negatiivisia syitä.

Tutkimuksessa analysoidaan yleisimmän m.3243A>G-mutaation (n. 80 % potilaista, käytetään myös nimeä A3243G) lisäksi seuraavat harvinaisemmat MELAS-oireyhtymää aiheuttavat mutaatiot: m.3271T>C (<10 % MELAS-potilaista, T3271C), m.3252A>G (<5 % MELAS-potilaista, A3252G), m.13513G>A (G13513A), sekä m.4332G>A (G4332A).

Tulkinta

Mikäli näytteessä todetaan jokin tutkituista MELAS-oireyhtymää aiheuttavista mutaatioista heteroplasmisena (normaalin mtDNA:n rinnalla), löydös on diagnostinen mitokondriotaudille. Yleensä mutantin mtDNA:n prosentuaalinen määrä korreloi osittain taudin vaikeusasteeseen.

MELAS mutaatio-DNAn tiedetään valikoituvan pois veren valkosoluista ikääntymisen myötä, vaikka lihaksessa mutaatioprosentti olisikin korkea. Siksi verinäytteestä tehtävän MELAS-mutaatioanalyysin tulos on epäluotettava aikuispotilailla. Suosittelemme MELAS-mutaatioanalyysiä lihaskoepalasta tai vaihtoehtoisesti uroepiteelin soluista.

Huomautuksia

Positiivisen tuloksen jälkeen suositellaan potilaalle ja hänen sukulaisilleen perinnöllisyysneuvontaa, koska mutaatio periytyy maternaalisesti. Mikäli löydös jää negatiiviseksi ja histologinen tutkimus viittaa mitokondriotautiin, kannattaa harkita mtDNA:n läpisekvensointia (22065 Ts-NGSmMT2) tai mitokondriotauteja aiheuttavien tuman geenien tutkimusta (22066 B -NGSgMT3) tai molempia (22069 Ts-NGSpMT1).

Kiireellisestä tutkimuksesta (tulos kahden viikon sisällä) on ilmoitettava etukäteen laboratorioon ja kiireellisyys on merkittävä selvästi lähetteeseen. Tutkimuksesta peritään kiireellisyyslisä eikä jatkotutkimuksia tehdä kiireellisinä ilman erillistä pyyntöä.